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Protein Maker全自动蛋白纯化

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高通量蛋白质组学实验室中蛋白纯化

 

Protein Maker™适用于高通量蛋白质组学实验室中蛋白纯化。解决了目前蛋白纯化的瓶颈,允许研究者设定或运行标准的中压色谱实验,可以多达24个单独的化学柱,每一个都有自己的缓冲液体系(平衡缓冲液A,洗涤缓冲液B,strip buffer和水)。Protein Maker™结合24个精密的注射器泵,每一个有8个阀头,新型的泵系统和高分辨率的桶架可以精确的传输。(下图)

 

Protein Maker™主要包括泵架、管架和控制软件。泵架包括24个不同的注射器泵(1~50mL容量),每一个连有8个阀门。每一个阀门连接不同的溶液。当使用5mL注射器时流量可以调整为0.25~20mL/min。

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

多达24个标准的预填柱(1~10mL)可以安装在阀门上。板架上有20个位置,用于放置SBS板或块。可以用于样品的装载,也可以用于专用洗涤缓冲液等的载入。点击用户界面允许操作者选择不同的柱或改变参数用于自动化的操作,也可以进行手动的抽吸和分配操作。从开始到结束,Protein Maker™运行24个不同的1mL柱需要大约一小时。其中包括个别调整反应梯度(开始时输入24-10mL蛋白样品)。

图2:Protein Maker™板架

  适用于高通量蛋白质组学实验室中蛋白纯化

  • 平行蛋白色谱法
  • 24个平行的纯化
    –Production Mode(24个不同的蛋白样品,1种类型的色谱树脂
    – Scouting Mode2(4个不同的色谱树脂,一种蛋白样品)
    –Complex Purification Mode(二维色谱)
  • 可以运行24个色谱柱(0.1~10mL)
  • 全自动操作
  • 广泛的样本容量—0.5mL到250mL样本容量
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Protein Maker™w88永利402中文版

 

 

 

 

  • 选择操作方法和循环数
  • 设置每一次操作的流量
  • 选择平衡和洗涤的循环数
  • 设置每一板的体积和洗涤剂的组分
  • 完全自动化的控制每一个泵、阀门和管架的位置

 

 

应用


• 250mL初始体积中进行抗体纯化(i.e.蛋白A亲和色谱法)
• 使用免疫损耗树脂进行质谱检测中样品的准备和生物标记物的发现(血浆和脑脊髓液)
• (表面)诱导蛋白构建的平行表达和纯化检测( Ni-chelate chromatography)
• 24蛋白质样品可以平行处理,蛋白质产量可以足够用于大量的分析实验

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图5: 样品从粗E.coli重提取,包括His6x-tagged重组蛋白,通过6个单独的IMAC柱同时运行两次(顶部)。Protein Maker™平行运行的12种不同的蛋白突变的SDS-PAGE分析。从纯化的蛋白中发现两种新的结晶形式(低于200次的结晶实验)(底部)。

 

 
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